Сбор эмбрионов D.melanogaster | Практическая молекулярная биология

Комментарии.

Данного количества хватает на заливку 40-45 чашек диаметром 150mm.
Вместо яблочного сока мы используем пиво "Очаковское оригинальное". Эффект от него не хуже, чем от яблочного сока, а по цене в два раза дешевле.
Чашки с подложками хранятся на +4^oС. Их можно использовать несколько раз. Главное - не давать им пересохнуть.
Подложки используются с двумя целями: привлекают мух запахом и не дают высохнуть дрожжевой суспензии, которую на них наносят.
Мы собирали 12 часовых эмбрионов: в 9:00 и в 21:00. В один 10 литровый цилиндр мы сажаем по 13-15g мух. Чашки с подложками мажем дрожжевой суспензией (100g дрожжей + 30ml сока или пива). Мухи гибнут на сильно влажных дрожжах, но не могут есть сухие. Нужно что-то среднее. В один цилиндр помещаем за раз две чашки, на которых в сумме находится 25g дрожжей. Дрожжи необходимо наносить на чашки равномерно, т.к. мухи откладывают эмбрионы только на них. Чашки заменяются новыми каждые 12 часов в течение трёх суток. Чашки c уже собранными эмбрионами хранятся в это время на +4^oС в условиях, когда эмбрионам трудно пересохнуть, но они могут дышать.

> Методы > Работа с D. melanogaster > Сбор больших количеств эмбрионов. Сбор эмбрионов D.melanogaster.		Главная. Новости. О проекте. Справочник. Рестриктазы. Методы. Растворы. Расчёты. Обзоры. Обучение. Ссылки. Скачать сайт. Образовательные ресурсы.
	Павел Марданов; Дарья Копытова Институт Биологии Гена; группа экспрессии генов.
Перед началом сбора необходимо приготовить большую популяцию мух; приготовить контейнеры для мух; залить чашки с подложками, на которые будут наноситься дрожжи; пересадить мух в контейнеры. Приготовление контейнеров. Контейнеры представляют из себя пластиковые цилиндры объёмом 10-15 литров с одним или двумя рукавами из капрона, через которые можно менять чашки, выпуская наружу лишь небольшое количество мух. Мы используем 10 литровые цилиндры с одним капроновым рукавом длиной 120cm. Приготовление чашек с подложками для сбора эмбрионов. Приготовление агаровых подложек: вскипятить 1620ml воды; добавить 50 грамм сахара; добавить 70g агара, избегая образования комков; добавить 473ml яблочного сока; вскипятить; остудить до 80-90°С; разлить по чашкам.