> Методы > Разное > Процент включения.
Определение процента включения.
Главная.
Новости.
О проекте.
Справочник.
Рестриктазы.
Методы.
Растворы.
Расчёты.
Обзоры.
Обучение.
Ссылки.
Скачать сайт.
Образовательные
ресурсы.
Преципитацию 10% ТХУ можно использовать для определения процента включения практически для любого вида мечения (для олигонуклеотидов от 10b).
- перенести совсем небольшое количество материала реакции на маленький (~3х3mm2) GFC-фильтрик (только обмакнуть желтый типчик и перенести на фильтр то, что задержалось на стенках типа);
- просчитать на ручном счетчике (лучше подобрать такое положение счетчика, чтобы стрелка отклонялась на полную шкалу);
- поместить фильтрик на вакуумную промывалку и промыть ~0.5ml 10%ТХУ;
- просчитать на ручном счетчике (положение счетчика как в п.2).
- нанести 0.5-1.0µl образца на Whatman 3MM бумагу, подсушить;
- 20' хроматография в
- свободные нуклеотиды оказываются в верхней части бумаги. Олигонуклеотиды (>5b) и длинная DNA остаются в местах нанесения.
Хроматография (для большого числа образцов).
3.5M (NH4)2SO4
75mM NaPO4(pH 6.8)
2% n-propanol;
