> Методы > Работа с белками > Осаждение белков ТХУ.
Осаждение белков трихлоруксусной кислотой.
Главная.
Новости.
О проекте.
Справочник.
Рестриктазы.
Методы.
Растворы.
Расчёты.
Обзоры.
Обучение.
Ссылки.
Скачать сайт.
Образовательные
ресурсы.
Дмитрий Жарков
Department of Pharmacological Sciences, State University of New York at Stony Brook, (631) 444 3585.
Department of Pharmacological Sciences, State University of New York at Stony Brook, (631) 444 3585.
- к раствору белка добавить 1/10 объёма 100% ТХУ;
- инкубировать 30' на льду или 15' при -20oC;
- к раствору белка добавить 1/10 объёма 0.15% дезоксихолата натрия;
- выдержать 10' при NT;
- добавить 1/20 первоначального объема 100% ТХУ;
- ЦФ 5' в эппендорфовской центрифуге на максимальной скорости;
- отсосать супернатант пипеткой;
- далее можно:
(a) растворить в 50-100µl 0.1 N NaOH;
(b) промыть 1ml смеси этанол-эфир 1:1 (можно несколько раз, если надо хорошо удалить кислоту), после центрифугирования осадок подсушить и растворить в нужном буфере.
Способ 1 (минимальная концентрация белка 5µg/ml).
Способ 2 (минимальная концентрация белка <1µg/ml и немного быстрее в исполнении).
Продолжение общее для обоих способов.
